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质谱定量卵白质组学-iTRAQ

概述

    卵白质组学（Proteomics）表现“一种基因组所表达的全套卵白质”，即包罗一种细胞以致一种生物所表达的所有卵白质。卵白质组学是一门以片面的卵白质性子研讨为底子，在卵白质程度对疾病机理、细胞形式、功效联系等方面举行探究的迷信。
      iTRAQ技能（isobaric tags for relative and absolute quantitation）是比年因由美国使用生物体系公司ABI研发的一种新的卵白质组学定量研讨技能。该技能接纳4种或8种同位素编码的标签，经过特异性标志多肽的氨基基团，之落伍行串联质谱剖析，可同时比力4种或8种差别样品中卵白质的绝对含量或相对含量。

■ 可同时标志2～8个样本

■ 标志完全，标志服从高达 97%以上

■ 较高的反复性，能简化谱的庞大水平、进步离子强度

■ iTRAQ技能不但可发明胞浆卵白，另有膜卵白、核卵白、胞外卵白。iTRAQ技能可检测出低品貌卵白、强碱性卵白、小于10KD或大于200KD的卵白

■ 可标志修饰后的氨基酸，因而对磷酸化卵白等翻译后修饰卵白举行定性定量研讨

■ 陈诉离子的绝对分子质量较低(113～121)，低分子量区是质谱定性(质量确定)和定量(品貌比力)较为正确的地区，因而质谱检测更为敏捷牢靠

■ 样本颠末差别处置后提取卵白质

■ 卵白质颠末复原，关闭后胰卵白酶酶切

■ 肽段混淆物辨别用差别的iTRAQ试剂标志

■ 等量混淆种种iTRAQ试剂标志的肽段

■ MS/MS质谱检测及剖析

■ 同时标志 8 个样品，一次实行完成多达 8 个样品的卵白质判定和定量

■ 可以举行多个工夫点卵白质组静态变革的监测

■ 可以剖析细致分期／型的临床疾病样本，并可设计样本反复

■ 细胞周期、细胞信号传导整个历程的卵白质组静态学研讨